ROTOXKIT F

El kit ROTOXKIT F se presenta en dos formatos: Acute ROTOXKIT F, contiene los materiales necesarios para realizar seis ensayos de toxicidad aguda y Short-Chronic ROTOXKIT F para tres bioensayos de toxicidad crónica.

La especie del ensayo corresponde a un rotífero de agua dulce Brachionus calyciflorus (los rotíferos son miembros ecológicamente importantes de muchas comunidades acuáticas. En conjunto con copépodos y crustáceos cladóceros constituyen los principales componentes del zooplancton de agua dulce, con velocidades de recambio mayores que aquellas para crustáceos).

El kit provee de instrucciones e ilustraciones detalladas del procedimiento. El kit proporciona el organismo de ensayo como huevo “durmiente” (quiste) pudiendo reactivarse en menos de 24 h para utilizarse en un ensayo.

El ensayo Acute ROTOXKIT F está basado en la mortalidad del organismo, obteniéndose LC50 24 h.

El ensayo Short-Chronic ROTOXKIT F mide la disminución en la reproducción de los rotíferos bajo estrés tóxico luego de 48 h de exposición, obteniéndose EC50 48 h.

A la izquierda se muestra Acute RotoxKit, a la derecha Short-Chronic RotoxKit.

Contenido:

• Tubos con quistes, soluciones de dilución de medio de recuperación concentrado y de agentes tóxicos, recipientes de recuperación y ensayo, y micropipetas para la transferencia de los organismos.
• Protocolos detallados y resumidos, hojas de registros y cálculos.
• Para ensayos de toxicidad crónica: tubos con microalga inmovilizada en gránulos, un portador de medio de disolución de matriz, tubos con polvo de Spirulina y un portador con Lugol como fijador para ensayo de conteo de rotíferos.
• Hojas de especificaciones con el número de lotes de los quistes, medio y gránulos de alga.

Reproducibilidad:

• Utilización de quistes evita la variabilidad asociada con la mantención de cultivos vivos en ensayos tradicionales.
• Micropocillos estándares construidos con materiales biológicamente inertes para asegurar uniformidad en ensayos.
• Para chequear la precisión y reproducibilidad se proporciona un ensayo de control de calidad.

Sensibilidad:

• Dependiente del compuesto químico, pero altamente sensible para mezclas y compuestos químicos en particular.
• La determinación de la inhibición de crecimiento con Short-Chronic Rotoxkit F es de importancia ecológica como parámetro indicador del impacto de agentes tóxicos sobre este grupo de microorganismos en la cadena alimentaria acuática.

Validación:

• Los ensayos de toxicidad aguda con B. calyciflorus son estándar ASTM desde 1991.
• Se propone su uso en “Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater” (1998) para ensayos de inhibición de crecimiento 48 h con rotíferos. Los ensayos de toxicidad crónica también son considerados como un nuevo AFNOR Guideline en Francia.

Costo-efectividad:

• Los quistes pueden ser cosechados según se requiera, eliminando la necesidad y costos de mantención y cultivo de los organismos del ensayo.
• Mínimos requerimientos de equipamiento (microscopio, incubador pequeño, material de vidrio convencional).
• Duración de almacenaje garantizada bajo apropiadas condiciones.

Ventajas:

• Placas micropocillos multipropósito especialmente diseñadas para cosecha, lavados y 36 ensayos agudos o 48 ensayos crónicos para una fácil y rápida transferencia del organismo de prueba bajo microscopio de disección o lupa estereoscópica.
• Tiempo total estimado para el ensayo es alrededor de 1 h para ensayos de toxicidad aguda y 2 h para ensayos de toxicidad crónica breve.